تشخيص التهاب الكبد الفايروسي نمط ب باستخدام تقنية تفاعل السلسلة المتبلمرة PCR
الملخص
الخلاصة
الكشف عن الحامض النووي DNA للفايروسHBV-DNA )) يعد كدليل أكيد للاصابة بجزيئة الفايروس لذا استخدمت تقنية السلسلة المتبلمرة (PCR) عالية الحساسية للكشف المباشر عن تسلسل الحامض النووي للفايروس بدلا من الكشف عن المستضد السطحي (HBsAg) .
تطلبت الطريقة استخدام عينات من المصل بعضها مشخص اصابتها بالتهاب الكبد الفايروسي نمط ب بطرق اخرى , وبعضها اخذت بصورة عشوائية , ثم تمت عملية عزل و استخلاص وتنقية الحامض النووي DNA من المصل ثم تمت عملية الهضم باستخدام محلول محلل (Lysis solution) وبعدها تمت اضافة الـــ Sorbent لادمصاص الــ DNA المستخلص لكي يتم مضاعفته باستخدام primer خاص بجزيئة فيروس التهاب الكبد نمط ب باستخدام جهاز الPCR ثم الكشف عن نتائج التضاعف على هلام الاكاروز .
اظهرت النتائج من تضاعف DNAالفايروس (HBV-DNA ) في العينات مقارنة مع نماذج السيطرة الموجبة والسالبة دقة الفحص اذ اعطت العينات الماخوذة من المرضى المشخص اصابتهم سيرولوجيا بالمرض(HBsAg) نتائج موجبة وبعضها نتائج سالبة بتقنية PCR , اما العينات الماخوذة بصورة عشوائية فاغلبها اعطت نتائج سالبة , اذ تمت قراءة النتائج اعتمادا على وجود او غياب الحزم المتخصصة بالحامض النووي المضاعف للفيروس بعد ترحيله في هلام الاكاروز .
معرّف المصادر الموحد
http://www.iiir-mim.gov.iq/xmlui/handle/123456789/829حاويات
- البحوث [1573]