تحضير عدة لقياس تركيز البوتاسيوم في الدم

Abstract

الخلاصة تم تحضيرعــــدة لقيـــــــــاس تركيز ايون البوتاسيوم في الدم بأستخدام طريقة التعكير Turbidimetric حيث تم ترسيب البوتاسيوم في وسط قاعدي بأستخدام (sodium tetraphenylborate) وتم قياس العكرة الناتجة من تكون ملح الـ potassium tetraphenylborate والتي تعطي امتصاصية في طول موجي 578 نانوميتر وتكون كمية العكرة متناسبة طرديا" مع تركيز البوتاسيوم في الدم ((1.2 .

المفتاح : Potassium in Blood , Determination of Potassium in Blood

المقدمة البوتاسيوم من أهم الالكتروليتات الفلزية mineral electrolytes في الجسم ، حيث ان 98 % منه يوجد داخل الخلايا ويلاحظ ان أقل تغيير في تركيز البوتاسيوم الموجود خارج الخلايا قد يؤدي الى تأثيرات كبيرة وخطيرة على القلب والاعصاب والعضلات . اذ ان العضلات تحتاجه لكي تتقلص وعضلات القلب تحتاج البوتاسيوم لكي تنبض وكذلك لتنظم ضغط الدم وتقوم الكلية عادة بتنظيم مستوى البوتاسيوم حيث تطرح الكميات الفائضة منــه في الادرار . يترواح المستوى الطبيعي للبوتاسيوم في الدم بين 3.5-5mEq/L) ( يمكن تقسيم اضطراب مستوى البوتاسيوم في الدم الى حالتين : - 1. انخفاض مستوى البوتاسيوم وهو مايسمى (Hypokalemia) ومن أهم مسببات هذه الحالة هي : - - تعاطي الادوية من نوع المدرات للبول (diuretics) . - الاسهال أو استخدام الملينات (Laxatives) . - فشل الكلية الحاد . - اللوكيميا . 2. ارتفاع مستوى البوتاسيوم وهو مايدعى (Hyperkalemia) ويعتبر الارتفاع الشديد في مستوى البوتاسيوم من الاعراض الخطرة والتي تسبب توقف القلب (cardiac arrest) ثم الوفاة .

الجزء العملي اولا" :- مبدأ التفاعل :- يتـــــــم ترسيب البوتــاسيوم في وســـط قــــــــاعدي بأستخـــدام ملــحSodium tetraphenylborate حيث يتكــــون معلــق عكــر مـــــن potassium tetraphenylborate . وتتناسب كمية العكرة المتكونة مع تركيز البوتاسيوم في المحلول حيث تعطي امتصاصية في طول موجي 578 نانوميتر.

ثانيا" : المواد المستخدمة :- ) محلول رقم 1R1(: Precipitating Reagent ( Trichoro acetic acid ) 0.3 mol\L (R2a) :Sodium tetraphenylboron 0.2 mol\L محلول رقم 2 (R2b): Sodium hydroxide 2.0 mol\ L محلول رقم 3 Potassium standard solouion of Potassium of 5 mmol\L

ثالثا" :طريقة اجراء الفحص : - تحضير الــــ working reagent تمزج احجام متساوية من R2a+ R2b مزجــا" جيدا" ثم تترك لتستقر لمدة (30-15) دقيقة قبل الاستخدام. ظروف الفحص :- يتم اجراء الفحص في طول موجي578 نانو ميتر . درجة حرارة الغرفة 37°C. يتم تصفير جهازالـ Spectrophotometer بأستخدام الماء المقطر . - يؤخذ انبوب اختباروتوضع فيه الاضافات التالية :

50 Sample (μl) 500 Precipitating sol. (μl) - تمزج بعناية . - توضع في جهاز طرد مركزي ذو سرعة عالية لمدة 5 الى 10 دقائق . - تفصل الطبقة الرائقة وتسكب في انبوب وحسب التالي :-

Sample Standard 1 ml 1 ml Working reagent -- 100 µl Standard 100 µl -- Supernatant تمزج جيدا" وتترك لتستقر لمدة 5 دقائق . ثم تقرأ الامتصاصية للـ Sample وStandard خلال 30 دقيقة .

رابعا" الحسابات :- (A)sample Potassium = x conc. of standard mmol\L ( A)standard

A= Absorbance at 578 η m conc. of standard = 5 mmol\L

النسب الطبيعية للبوتاسيوم : (1,2) في مصل الدم 3.6- 5.5 mmol\L في بلازما الدم 4 – 4.8 mmol\L

النتائج والمناقشة - تم أخذ 14 عينة من مرضى مصابين بحالات مختلفة من امراض الجهاز البولي ( كالعجز الكلوي) أو مرضى القلب الذين قد يشك الاطباء بأختلال نسبة آيون البوتاسيوم لديهم . وقد اجريت هذه الفحوصات بأستخدام العدة البحثية والعدة الاجنبية لشركة SPINREACT وكانت النتائج متطابقة لكلتا العدتين كما هو موضح في الجدول رقم ( 1) . - نظرا" لحساسية تركيز ايون البوتاسيوم في الدم وخشية تأثره بالايونات الاخرى الموجودة عادة في الجسم تم تحضير محاليل قياسية من البوتاسيوم واضيف اليها تراكيز مختلفة من املاح الايونات المعروف تواجدها بشكل طبيعي في الدم وأعطت نتائج مطابقة ايضا" ]جدول رقم (2) [ جدول رقم (1) مقارنة بين العدة البحثية مع عدة اجنبية على 14 حالة مرضية العدة الاجنبية العدة البحثية رقم النموذج Conc.; of K (mmol\L) Abs.; of Serum Conc.; of K (mmol\L) Abs.; of Serum 3.8 0.161 3.7 0.153 1. 4.2 0.169 4.3 0.164 2. 4.2 0.169 4.3 0.164 3. 4.5 0.176 4.4 0.166 4. 4.1 0.167 4.2 0.162 5. 3.8 0.161 3.9 0.157 6. 3.8 0.161 3.8 0.153 7. 3.9 0.162 3.9 0.157 8. 4.3 0.172 4.4 0.165 9. 3.6 0.158 3.6 0.151 10. 4.9 0.185 5.0 0.177 11. 5.0 0.187 5.1 0.179 12. 4.9 0.185 4.8 0.173 13. 4.5 0.176 4.6 0.169 14.

جدول رقم (2) تأثير اضافة ايونات مختلفة الى الدم على تركيز البوتاسيوم القياسي الايونات المضافة تركيزها تركيز البوتاسيوم القياسي mmol\L تركيز البوتاسيوم بعد اضافة الايونات mmo\L Calcium 200 mg\L 6.52 6.57 Cobalt 500 µg\L 6.52 6.52 Ammonium 1-2 mmol\L 6.52 6.63 Manganese 25 mg\L 6.52 6.54 Copper 40 mg\L 6.52 6.48 Magnesium 10 mmol\L 6.52 6.41 Zinc 12 mg \L 6.52 6.47 Sodium 150 mg \L 6.52 6.78

الاستنتاجات نظرا" الى دقة هذه الطريقة عند التحليل وحساسيتها للمواد المراد فحصها كذلك الاحجام المستخدمة في التفاعل صغيرة نسبيا" اضافة الى بساطة وقلة كلفة المواد والاجهزة المستخدمة لذا تعتبر هذه الطريقة هي الافضل لقياس البوتاسيوم في الدم والتي يمكن اتباعها في المختبرات الطبية . علما" ان العدد الموجودة في الاسواق المحلية هي اجنبية المنشأ ولايخفى أهمية تصنيع عدة محلية بمواصفات موازية للعدة الاجنبية من الناحية الاقتصادية والعلمية .

المصادر :

1. Matthieu tubino ,RafaelL.desouza and NelciF.Hochr. Rapid Quantitative Turbidimetric spot test Analysis of Potassium in blood serum. J.Braz.Chem .Soc.vol .15,NO.5 , 35-639.(2004) 2. Tietz text book of clinical chemistry and Molcular Diagnostics . 4 th ed. Vol.3 P 984-986 (2004) . 3. Hilmann,G.Beyer ,G.Z.klin.chem. klin. Biochem 5,93(1967).