دراسة الفعالية المايكروبايولوجيه لمستخلص نبات الثوم العراقي ومقارنته مع الثوم المستورد

Abstract

الخلاصــه دراسة الفعالية البايولوجية لمستخلص الثوم العراقي (المائي والمذيب العضوي) وقورنت مع الفعالية البايولوجية للثوم المستورد . أظهرت التجارب المختبرية ان المستخلص المائي لنبات الثوم ( العراقي والصيني ) الفعالية البايولوجية مقبولة ضــد بكتريـــا Staphylococcus aureus وكان معدل قطر منطقة التثبيط للمستخلص المائي للثوم العراقي (22mm ) والصيني حوالي (( 25mm عند مقارنته مع المضاد الحيوي Gentamycin الذي سجل قطر منطقة التثبيط (28mm ). بينما المستخلص بالمذيب العضوي للثوم ( العراقي والصيني ) له فعالية ضد بكتريا Staphylococcus aureus لكنه اقل من المستخلص المائي اذ سجل الثوم العراقي (12mm) والصيني (14mm) تقريبا عند مقارنته مع المضاد الحيوي Gentamycin الذي سجل قطر منطقة التثبيط (28mm ). اجريت عدة تجارب لمعرفة افضل درجة حرارة لتحضير المستخلص وقد تبين ان تحضيره بدرجة حرارة الغرفة هو الافضل . وفي تجارب اخرى جرى اختبار مدى بقاء الفعالية البايولوجية للمستخلص ومدى تأثيرها بدرجة حرارة الخزن ومدة الخزن وقد تبين ان خزن المستخلص في الثلاجة بعد تحضيره يحتفظ بفعالية افضل من بقاءه بدرجة حرارة الغرفة .

المفتاح : الفعالية المايكروبايولوجية , نبات الثوم .

المقدمـــة الثوم هو نبات حولي شديد القدرة على التحمل اسمه العلمي Allium stavium والاسم الانكليزي garlic ينمو بارتفاع (30-90cm ) البصلة (Bulb ) تمثل الجزء الرئيس للنبات والتي تستخدم طبيا ،ان لكل 100غرام من الثوم يحتوي على المواد التاليه : الماء بنسبه 62.8 % والبروتين 6.3 % والزيوت الاساسية 0.1 % والكربوهيدرات 29 % والكالسيوم0.03 % والفسفور0.31 % والحديد3.1 % . كما يحتوي الثوم على بعض المضادات الحياتية منها الالستاتين الاول والثاني Allistatin I,II . ان مادةالـ Alliinهي المسؤولة عن تحرير المركبات الفعالة والتي هي مشتقات مختلفة من الحامض الاميني Cysteine . وعند سحق الثوم اثناء الاستخلاص فان المركب AlliinS-ally Cysteine Sulfoxide يتحول الى Allicin و هو Diallylthiosulfonate بفعل انزيم Alliinase . ان للثوم استعمالات كثيرة ومتنوعة فضلا عن استعماله في الغذاء فقد استخدم في الطب منذ قرون عديدة كدواء مضاد لعدد من الامراض منها ذات الرئة ومعقم للجروح وعضات الافاعي . ولقد اشارت دراسات عديدة ان الثوم يعمل مضادا للبكتريا والفطريات . يعمل على خفض ضغط الدم كذلك يعمل على خفض المستوى العالي للكوليسترول في الدم ،و يعمل مضاد لتجلط الدم .

الجزء العملي أ -المستخلص المائي:غسلت أبصال الثوم جيدا وقشرت بواسطة سكين نظيفة،وزن (50 gm) من فصوص الثوم النظيفة ويضاف أليه (100ml) من الماء المقطر وخلطت جيدا في الخلاط الكهربائي. رشح الخليط المهروس بمساعدة الضغط المخلخل , جمع الراشح بقنينة بخنر اجريت عليه كافة الفحوصات لقياس الفعالية البايولوجيه. اجريت عملية الاستخلاص نفسها على الثوم الصيني من اجل المقارنه. أعيدت التجربة المذكورة انفا في درجات حرارية مختلفة لمعرفة مدى تأثير الحـرارة على الماده ألفعاله لنبات الثوم. ب-المستخلص بالمذيب العضوي( الهكسان) : جففت أبصال الثوم وطحنت بالمطحنه الكهربائية،وزن (20gm ) منه ويوضع في Thumbal الخاص بجهاز Saxholate ويتم إضافة (200ml ) من مذيب الهكسان في دورق ويتم تشغيل الجهاز لمدة 24 ساعة وبعد ذلك يؤخذ المستخلص ويركز باستعمال جهاز المبخر الدوار. ترك المستخلص يجف بدرجة حرارة الغرفة ، اجرى عليه اختبار الفعالية البايولوجية .

المناقشه والاستنتاج كانت نتائج التجارب التي اجريت على مستخلصات الثوم (العراقي و الصيني) 1- تحضير مستخلص الثوم المائي بدرجات حرارة مختلفة : شملت هذه التجربة تحضير المستخلص المائي بدرجات حرارية مختلفة وذلك لمعرفة افضل درجة حرارة لتحضير المستخلص،وكانت النتائج كما مبين في الجدول رقم (1).وتم فحص فعالية الثوم على بكتريا Staph.aureus ومقارنتها مع المضاد الحيوي Gentamycin.

جدول رقم (1) يبين فعالية مستخلص الثوم المائي بدرجات حرارةمختلفة ضد بكتيريا Staph.aureus Gentamycin B3 A3 B2 A2 B1 A1 Sample 22 18 22 20 19 23 22 Inhibition Zone Diameter(mm) ونلاحظ من الجدول ان افضل نتيجة للمستخلص المائي للثوم المحلي والمستورد هي بدرجة حرارة الغرفة (25_30c) وذلك بسبب سهولة تهشيم جدران خلايا الانسجة النباتية وتحرير المركبات الموجودة فيه بالاضافة الى احتمال زيادة التفاعلات الانزيمية في تحويل مادة الالينينAlliin غير الفعال الى مادة الاليسنAllicin المسوؤلة عن الفعالية الموجودة في نبات الثوم بواسطة انزيم Allinase. بينما النماذج المحضرة بدرجات حرارة عالية وباردة كانت اقل فعالية وذلك لان هذه الدرجات تحد او تقيد النشاطات الانزيمية عامة. 2- دراسة تاثير ظروف الخزن ومدة الخزن على فعالية مستخلص الثوم المائي: حضر مستخلص الثوم المائي(المحلي والمستورد) وقيست الفعالية البايولوجية له خلال فترات زمنية متباعدة لمعرفة تاثير الزمن وافضل درجة حرارة للخزن على بقاء المادة الفعالة في المستخلص اذا احتفظ به بدرجة حرارة الغرفة لمدة 21 يوما والنموذج الاخر بدرجة حرارة الثلاجة ( 2-4م ° ) وللفترة الزمنية نفسها. وبعد اجراء الفحص البايولوجي للنماذج على بكتيريا Staph.aureusومقارنته مع المضاد الحيوي Gentamycine ، كانت النتائج كما هو مبين في الجدول رقم (2) والجدول رقم (3) التاليين. جدول رقم (2) يبين الفعالية البايولوجية بدرجة حرارة الغرفة (C ° 25 – 30 )، رمز للثوم العراقي ب A1 ورمزللثوم الصيني 1B Gentamycin After 21 days After 14 days After 7 days After 5 days Diameter 1st day Sample 28mm 12mm 20mm 22mm 22mm 22 mm A1 Inhibition zone diameter 28mm 18mm 24mm 27mm 27mm 27mm B1

جدول رقم (3) يبين الفعالية البايولوجية بدرجة حرارة الثلاجة(2 – 4 ) °C ، رمز للثوم العراقي ب A2 ورمزللثوم الصيني B2 Gentamycin After 21 days After 14 days After 7 days After 5 days Diameter 1st day Sample 28mm 18mm 27mm 26mm 30mm 22 mm A2 Inhibition zone diameter 28mm 19mm 27mm 27mm 26mm 25mm B2 يلاحظ من النتائج في الجدولين (2) و(3) ان المستخلص المائي المحفوظ بالثلاجة أفضل من المحفوظ بدرجة حرارة الغرفة التي تكون فيها الفعالية مستقرة, وكذلك ان تطاير المواد الناتجة خلال فترة الخزن تكون أبطا في درجات الحرارة الواطئة وعليه يمكن الاحتفاظ بمستخلص الثوم تحت درجات حرارة واطئة جدا للمحافظة على فعالية المادة الفعالة ضد البكتريا. 3- تحضير المستخلص المائي بدرجة حرارة غليان الماء : في هذه التجربة تم تحضير المستخلص المائي للثوم (العراقي والمستورد ) في درجة غليان الماء وكانت النتيجة عدم وجود اي فعالية لهذا المستخلص ضد نفس البكتيريا بسب توقف فعالية انزيم Alliinase المسؤول عن تحويل الماده الخامله Alliinالى مادة الفعالهAllicin . 4- تحضير مستخلص الثوم بالمذيب العضوي: حضر مستخلص الثوم (العراقي والصيني )بالمذيب واجرى فحص الفعالية البايولوجية له على نفس البكتريا Staph.aureus ومقارنتها مع المضاد الحيوي Gentamycine، وكانت النتائج كما ياتي: A1(ثوم عراقي) 12 mm / B1(ثوم صيني) 14 mm / Gentamycine 23 mm كمــــــا اجري فحــص للمـســــــــــتخلص المــــائي للثــــــوم بواســــــــــــــــطة جـهــــــاز HPLC High- performance liquid chromatography) ) للكشف عن المادة الفعالة (Allicin ) ،وتبين وجود هذه المادة في المستخلص المائي للثوم المحضر في المختبر (النموذج )عند مقارنتها مع مخطط لمادة قياسية (standard) [ 4] كما موضح في الشكل رقم (1)و(2) الشكل رقم (1) يوضح مادة Allicin الموجوده في المستخلص المائي للثوم Standard

المصادر 1- السلامي ،نبراس يحيى عبد الله : دراسة تاثير مستخلصات نباتي الياس .Myrtusl communis والثومAllium sativum في بكتريا Pseudomonas aerogenosa خارج وداخل الجسم الحي . جامعة الكوفة : كلية التربيه للبنات : 2006 . 2 – حرب ، تقييم الفعالية التثبيطية لمستخلصات الثوم Allium sativum . Lضد الجرثومة الحلزونية Helicobacter pylori . مجلة ابحاث البصرة للعلميات . الجزء ( 2) العدد (37 ) :68 – 60 : 2011 3- سليم ,زاهر محمد : تاثير مستخلص الثوم المائي على Bacillus cereus وبعض المايكروبات الاخرى وعلى انزيمي الببسين والتربسين. جامعة بغداد : كلية الزراعة (قسم الصناعات الغذائيه) : 1978 4 -Restek corporation.(800) 356-1688.(814)353-1300 http://www.restekcorp.com