تحضير اضداد نوعية تستخدم للكشف عن سرطان الرئة للعامل (PD-1 , PD-L1) بطريقة التفاعل الكيماوي المناعي النسيجي IHC

Abstract

يهدف البحث الى تحضير عدة تشخيصية لتشخيص سرطان الرئة بطريقة الكيمياء المناعية النسيجية عن طريق تحليل محاليل خاصة بالتقنية فضلا عن الاضداد النوعية المجهزة من شركة (Pathnsitu) الامريكية. اذ تعد تعتبر تقنية الكيمياء المناعية النسيجية (IHC) من اهم التقنيات المستعملة في الكشف عن مستضدات معينة في الانسجة البيولوجية كالبروتينات وصبغها بأضداد موسومة معتمدين بذلك على مبدأ الارتباط بين الاضداد والبروتين المستهدف وبذلك يتم الكشف عن البروتين مع الحفاظ على بنية وتكوين الانسجة الاصلية وخصائصها الخلوية. تم تزويد المركز بالأضداد النوعية (PD-L,1PD-1) المجهز من شركة (Pathnsitu) الامريكية اذ استخلص البروتين الطافر الذي يمثل code الطافر للجين المسبب للسرطان ليكون ضمن عدة الكشف عن سرطان الرئة بطريقة (IHC) بالتفاعل المناعي الكيماوي النسيجي. اظهرت النتائج التي اجريت على المقاطع النسيجية التي تم الحصول عليها من مرضى مصابين بسرطان الرئة (lung cancer) وغير مصابين في مستشفى اليرموك والمختبرات الاهلية (مختبر الدكتور راجي الحديثي) فعالية عدة نظام الكشف التي تم تحضيرها في مختبرات مركز الرازي شعبة الهندسة الوراثية مقارنة بالعدة القياسية التي تم تجهيزها من قبل الشركة الامريكية (Pathnsitu) من خلال اختبارها على قابلية تصبيغها للنماذج النسيجية المذكورة. حيث فحصت العينات وأجريت عليها خطوات تقنية كيمياء المناعة النسيجية ، وفحصت السلايدات بالمجهر الضوئي حيث كانت (20) من النماذج مصابة من خلال تصبغها باللون البني اما العينات الباقية فلم تصطبغ باللون البني دلالة على عدم اصابة النسيج . وأخذت (10) عينات من انسجة مصابة كما اخذت (10) عينات اخرى لأنسجة غير مصابة تم الكشف عنها مسبقا بواسطة العدة القياسية لشركة (Pathnsitu) وأجريت عليها خطوات تقنية كيمياء المناعة النسيجية مرة ثانية باستخدام عدة الكشف المحضرة في مختبرات مركز الرازي ، وكانت النتائج مقاربة بنسبة عالية مقارنة بالعدة القياسية. تم تحليل النتائج حسب الطريقة أوصت به (Fitzgibbons et. al 2010) , تغير لون النسيج الى اللون البني هو دليل ايجابي لإصابة النسيج من خلال تأكسد صبغة ال(DAB) بواسطة بيرو كسيد الهيدروجين بوجود الهيموغلوبين بإعطاء لون بني داكن. اون